Hoechst 33258染色液使用说明-标准-资讯-生物在线

Hoechst 33258染色液使用说明

作者:北京索莱宝科技有限公司--实验室产品 2016-04-08T00:00 (访问量:6273)

 Hoechst 33258染色液使用说明

货号C0020 规格:10ml/50ml

保存:-20避光保存,一年有效。

 

产品简介:      

    Hoechst 33258,也称bisBenzimide H 33258HOE 33258,是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。Hoechst 33258染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33258也常用于普通的细胞核染色,或常规的DNA染色。Hoechst 33258的最大激发波长为346nm,最大发射波长为460nmHoechst 33258和双链DNA结合后,最大激发波长为352nm,最大发射波长为461nm。本Hoechst 33258染色液可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色,也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。

使用说明:1. 对于固定的细胞或组织:    a. 对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst 33258染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的Hoechst 33258染色。    b. 对于贴壁细胞或组织切片,加入少量Hoechst 33258染色液,覆盖住样品即可对于悬浮细胞,至少加入待染色样品体积3倍的染色液,混匀。室温放置3-5分钟。    c. 吸除Hoechst 33258染色液,用TBSTPBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。    d. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。 2. 对于活细胞或组织:     a. 加入适当量Hoechst 33258染色液,必须充分覆盖住待染色的样品,通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液,对于96孔板一个孔需加入100微升染色液。     b. 在适宜于细胞培养的温度培养20-30分钟。弃染色液,用PBS或培养液洗涤2-3次即可进行荧光检测。

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